Введение
Инфекционные и паразитарные заболевания остаются одним из ведущих факторов, участвующих в развитии патологии желудочно-кишечного тракта (ЖКТ). В последнее время особое внимание уделяется бластоцистной инвазии, что обусловлено ее широким распространением и возможной потенциальной ассоциацией с развитием синдрома раздраженного кишечника (СРК).
Бластоцисты (Blastocystis spp., ранее Blastocystis hominis) – одноклеточные эукариотические анаэробные микроорганизмы группы Stramenopiles, паразитирующие в кишечнике человека и животных. Экологической нишей для Blastocystis spp. является просвет слепой и проксимальной части ободочной кишки. Род Blastocystis представлен множеством морфологически неотличимых субтипов, из которых на сегодняшний день наиболее полно описано 17. У человека наиболее часто среди них встречаются варианты ST1, ST2 и ST3. Предполагается, что представители различных субтипов отличаются по патогенному потенциалу и степени чувствительности к антипротозойным препаратам [1]. В образцах кала и культурах in vitro выделяют четыре основные формы бластоцист: вакуолярную, гранулярную, амебоидную и цистную [2]. Заражение человека бластоцистами осуществляется по фекально-оральному механизму передачи: контактно-бытовым, водным и пищевым путями. Этому способствует устойчивость во внешней среде цист [3].
Распространенность бластоцистной инвазии в мире варьируется в широких пределах (от 0,5 до 60%) и зависит от климатических, социально-экономических, санитарно-эпидемиологических характеристик региона, от метода исследования и особенностей исследуемой популяции [2, 4]. В Санкт-Петербурге, по данным отдельных авторов, распространенность бластоцистной инвазии составляет 10% от числа обследованных условно здоровых лиц [5], но отмечается значимо большая частота среди пациентов с HCV-циррозом печени, которая достигает 28,8% [6].
Ряд исследований демонстрирует позитивную ассоциацию бластоцистной инвазии с СРК [7–9], патологией кожи [10, 11], а среди пациентов детского возраста – с абдоминальным болевым синдромом, диареей и снижением массы тела. Бластоцистная инвазия описана как единственная идентифицированная причина клинических проявлений [12]. Описаны случаи бластоцистной инвазии среди иммунокомпрометированных и полиморбидных пациентов [13–15].
Роль Blastocystis spp. в патогенезе гастроинтестинальных заболеваний окончательно не ясна. В настоящее время большинство исследователей указывают как на потенциальное, так и на реальное участие Blastocystis spp. в патогенезе заболеваний ЖКТ. По мнению большинства авторов, клинические проявления бластоцистной инвазии неспецифичны и варьируются от бессимптомного носительства до выраженной гастроэнтерологической симптоматики – абдоминальных болей, нарушений стула, метеоризма, тошноты, и от кожных проявлений (папулезная сыпь, кожный зуд), что, вероятно, определяется генетическим полиморфизмом бластоцист и состоянием местного иммунитета слизистой оболочки кишечника [16, 17].
Согласно экспериментальным данным, протеазы бластоцист (в т.ч. металлопротеиназы, цистеин-протеазы, серин-протеазы) активируют каскад провоспалительных цитокинов, способствуют повышению проницаемости кишечной стенки и нарушению качественного и количественного состава микробиоты кишечника [8]. Получены данные, согласно которым Blastocystis spp. влияют на баланс кишечной микробиоты. Так, у пациентов с бластоцистной инвазией обнаружено снижение количества Bifidobacterium sрp. и Faecalibacterium prausnitzii [7].
По мнению ряда авторов, с учетом разной степени патогенности субтипов бластоцист вопрос назначения эрадикационной терапии необходимо решать индивидуально. Так, пациентам без клинических проявлений назначение противопротозойных препаратов не требуется, в то время как при наличии гастроэнтерологической симптоматики и кожных проявлений терапия необходима [16, 17].
Согласно СанПиН 3.2.3215-14 «Профилактика паразитарных болезней на территории Российской Федерации» (с изменениями на 29.12.2015) в отношении бластоцист регламентированы профилактические и противоэпидемические мероприятия, включающие лечение пациентов с бластоцистной инвазией с контролем его эффективности через 10–14 дней. Рекомендуемые схемы противопротозойной терапии инвазии Blastocystis spp. представлены в табл. 1. На сегодня препаратом первой линии остается метронидазол. При неэффективности терапии метронидазолом применяют препараты второй линии: триметоприм/сульфаметоксазол; нитазоксанид; паромомицин; тинидазол и др. При лечении бластоцистной инвазии также целесообразно использовать лекарственные средства для коррекции дисбиоза кишечника. Так, в рандомизированном простом слепом клиническом исследовании при бластоцистной инвазии у пациентов детского возраста с гастроэнтерологической симптоматикой (диареей, абдоминальной болью, тошнотой, метеоризмом) установлена эффективность пробиотического препарата на основе Saccharomyces boulardii [18].
На базе клиники Петра Великого и кафедры пропедевтики внутренних болезней, гастроэнтерологии и диетологии СЗГМУ им. И.И. Мечникова проведено собственное исследование, целью которого стало определить распространенность бластоцистной инвазии у пациентов с патологией органов пищеварения.
Методы
Методом сплошной выборки в исследование включены 130 пациентов с заболеваниями органов пищеварения, находившихся на амбулаторном и стационарном лечении в период с марта по июнь 2018 г., средний возраст которых составил 46,9±15,9 года (от 19 до 80 лет), с преобладанием лиц женского пола (68,5%). Структура гастроэнтерологической патологии у обследуемых пациентов представлена на диаграмме (рис. 1). Отмечено преобладание пациентов с воспалительными заболеваниями кишечника (ВЗК) – 36,1% (n=47), пациенты с СРК составили 26,1% (n=34), с заболеваниями гепатобилиарной системы, в т.ч. циррозом печени, функциональными расстройствами билиарного тракта – 15,3% (n=20). В исследование также были включены пациенты с диагнозом функциональной диспепсии, гастроэзофагеальной рефлюксной болезни, дивертикулярной болезни толстой кишки, неклассифицируемого колита, и другими заболеваниями ЖКТ (язвенная болезнь, рак прямой кишки, Cl. difficile-ассоциированный колит, экссудативная энтеропатия).
Все участники исследования заполнили анкету – опросный лист, направленный на выявление потенциальных факторов риска заражения бластоцистами, а именно низкого уровня образования, неблагоприятных коммунальных условий, наличия сопутствующих соматических и инфекционных заболеваний, приема антибиотиков, выезда в другие регионы, контакта с животными, с лицами с острыми кишечными заболеваниями, посещения предприятий общественного питания, употребления некипяченой воды и посещения бассейна. Выявление бластоцистной инвазии осуществлено двумя методами микроскопии нативного мазка кала с 2%-ным раствором Люголя и методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с родоспецифичными праймерами к SSU rDNA Blastocystis spp. [19].
Всем пациентам с установленной бластоцистной инвазией проведена противопротозойная терапия в соответствии с международными рекомендациями [17].
Результаты исследования
У 10,0% (n=13) от общего числа обследованных пациентов при микроскопическом исследовании нативного мазка кала выявлены Blastocystis spp. в вакуолярной форме в количестве от 1–2 до 5 и более микроорганизмов в поле зрения, результаты исследования подтверждены методом ПЦР. Другие простейшие и гельминты у обследованных пациентов не были обнаружены. У 1 (0,77%) пациента Blastocystis spp. были выявлены при микроскопии нативного мазка кала, однако методом ПЦР ДНК простейшего не была идентифицирована. При повторном микроскопическом исследовании Blastocystis spp. не выявлены, поэтому результаты микроскопического исследования расценены как ложноположительные. Кроме того, методом ПЦР ДНК Blastocystis spp. была идентифицирована у двух пациентов с отрицательными результатами при микроскопическом исследовании, что, вероятно, обусловлено низкой численностью бластоцист в исследуемом материале.
Таким образом, в отличие от метода микроскопии нативного мазка кала методом ПЦР бластоцисты были обнаружены у 11,5% (n=15) пациентов от общего числа обследованных. Поэтому для повышения достоверности результатов обнаружения Blastocystis spp. целесообразно использовать комбинацию методов: микроскопию нативного мазка кала и идентификацию ДНК бластоцист методом ПЦР, что согласуется с литературными данными [19, 20].
Частота выявления бластоцистной инвазии для каждой нозологии представлена в табл. 2. Blastocystis spp. выявлены при патологии как верхних, так и нижних отделов ЖКТ и в случае заболеваний гепатобилиарной системы. Статистически значимые различия распространенности данной паразитарной инвазии при различных гастроэнтерологических заболеваниях не выявлены. Однако при функциональных расстройствах билиарного тракта, СРК и неклассифицируемом колите Blastocystis spp. были обнаружены чаще, чем при ВЗК, заболеваниях верхних отделов ЖКТ и патологии печени.
Анализ субъективного обследования показал, что большинство (77,7%) обследованных пациентов предъявляли жалобы, характерные для синдрома кишечной диспепсии. Так, абдоминальные боли отмечены у 101 (77,7%) пациента, метеоризм – у 96 (73,8%), диарея – у 78 (60%), констипация – у 21 (16%) пациента. Анализ клинических проявлений у обследованных пациентов показал, что симптоматика бластоцистной инвазии была неспецифической: у большинства (n=14, 86,7%) пациентов наблюдались симптомы кишечной диспепсии. Так, абдоминальные боли отмечали 13 (86,7%) пациентов, нарушения стула – 13 (86,7%) (в т.ч. диарею – 9 человек, запоры – 4), метеоризм беспокоил 14 (93,3%) пациентов.
Анализ потенциальных факторов риска заражения не выявил статистически значимой связи наличия инвазии с уровнем образования, коммунальными условиями, наличием сопутствующих соматических и инфекционных заболеваний, приемом антибиотиков, выездом в другие регионы, контактом с животными, с лицами с острыми кишечными заболеваниями, посещением предприятий общественного питания, употреблением некипяченой воды и посещением бассейна.
Обсуждение
Полученные нами результаты показали сравнимую с общепопуляционной распространенность бластоцистной инвазии у пациентов с заболеваниями органов пищеварения. Следует обратить внимание на отсутствие специфических клинических симптомов при наличии бластоцистной инвазии, что затрудняет диагностику паразитоза, с одной стороны, с другой – указывает на необходимость скринингового обследования всех пациентов гастроэнтерологического профиля, особенно с симптомами кишечной диспепсии. В случае обнаружения инвазии Blastocystis spp. диагноз следует формулировать как бластоцистная инвазия (код по МКБ-10: А07.8 «Другие уточненные протозойные кишечные болезни»). Пациентам с патологией органов пищеварения при обнаружении Blastocystis spp. следует назначать противопротозойную терапию.
В качестве примеров приводим собственные клинические наблюдения больных гастроэнтерологическими заболеваниями, у которых после эрадикации Blastocystis spp. наблюдалась положительная динамика клинических данных.
Случай 1. Пациентка И. 1986 г.р. с 2011 г. наблюдается у гастроэнтеролога с диагнозом «СРК с преобладанием диареи». В 2018 г. при очередном ухудшении самочувствия в виде рецидива абдоминальных болей и диареи со стулом 6-го типа по Бристольской шкале со слизью до 6 раз в сутки в копрограмме выявлены проявления энтерального синдрома (стеаторея 2-го типа, креаторея, амилорея), при микроскопии мазка кала – Blastocystis spp. более 5 в поле зрения, при бактериологическом исследовании кала – признаки дисбиоза кишечника (снижение количества бифидо- и лактобактерий на 2 порядка). Диагноз был сформулирован как «СРК с преобладанием диареи. Бластоцистная инвазия. Дисбактериоз кишечника 1-й степени». Пациентке назначено комплексное лечение, включившее диету, препарат, нормализующий моторику ЖКТ (тримебутин), рифаксимин, противопротозойный препарат первой линии для эрадикации Blastocystis spp. (метронидазол 1,5 г в сутки в течение 10 дней) и препарат на основе Saccharomyces boulardii. На фоне назначенной терапии отмечена положительная клиническая динамика в виде нормализации частоты и консистенции стула и купирования абдоминальных болей. При контрольной микроскопии мазка кала через 14 дней после окончания противопротозойной терапии Blastocystis spp. не обнаружены.
Случай 2. Пациентка А. 1965 г.р. с диагнозом «СРК с преобладанием запоров», установленным в 2010 г., госпитализирована в отделение гастроэнтерологии клиники Петра Великого СЗГМУ им. И.И. Мечникова для дообследования с жалобами на боли в гипогастрии, купирующиеся после дефекации; констипации до трех дней со стулом 3-го типа по Бристольской шкале без видимых патологических примесей; метеоризм; снижение массы тела на 5 кг за полгода. По результатам эндоскопического обследования выявлены признаки долихоколон. При микроскопии мазка кала обнаружены Blastocystis spp. 2–3 в поле зрения. Диагноз был сформулирован как «СРК с преобладанием запоров. Бластоцистная инвазия».
Пациентка работала в детском образовательном учреждении и входила, таким образом, в группу риска, т.к. инвазия Blastocystis spp. чаще встречается в детских коллективах [21]. Комплексная терапия с применением спазмолитических, противопротозойных (метронидазол 1,5 г в сутки в течение 7 дней), желчегонных и пробиотических препаратов оказалась эффективной для купирования абдоминальных болей, нормализации частоты и консистенции стула, однако при контрольной микроскопии мазка кала обнаружены Blastocystis spp. в количестве 1–2 в поле зрения, что указывало на неэффективность противопротозойной терапии и требовало назначения повторной эрадикации простейшего. В качестве терапии второй линии был назначен тинидазол в дозе 2 г в сутки ежедневно в течение 5 дней. При контрольной микроскопии мазка кала через 14 дней после окончания противопротозойной терапии Blastocystis spp. не обнаружены.
По данным разных исследователей, процент эффективности эрадикации Blastocystis spp. с использованием метронидазола составляет от 60 до 96% и определяется различной резистентностью к метронидазолу субтипов бластоцист [6, 17, 22]. Эффективность препаратов второй линии была оценена лишь в нескольких работах, согласно которым процент эрадикации Blastocystis spp. составляет от 80 до 94% [17].
Случай 3. Пациент Я. 1964 г.р. наблюдается у гастроэнтеролога с диагнозом «функциональное расстройство билиарного тракта.
Дисфункция желчного пузыря» с жалобами на боли в правом подреберье после употребления жирной пищи, регургитацию горечью, неустойчивый стул (5–6-го типов по Бристольской шкале без видимых патологических примесей 2 раза в день). В мазках кала обнаружены Blastocystis spp. 3–4 в поле зрения. Диагноз был сформулирован как «функциональное расстройство билиарного тракта.
Дисфункция желчного пузыря. Бластоцистная инвазия». Назначена терапия антипротозойным препаратом (метронидазол 1,5 г в сутки в течение 10 дней), селективным спазмолитиком, препаратом урсодезоксихолевой кислоты, на фоне которой наблюдалась положительная клиническая динамика в виде купирования абдоминальных болей, нормализации консистенции стула. При повторной микроскопии мазков кала через 14 дней после окончания противопротозойной терапии Blastocystis spp. не обнаружены.
Заключение
Распространенность бластоцистной инвазии у пациентов гастроэнтерологического профиля составила 11,54%. Диагностика бластоцистной инвазии основана на обнаружении различных форм бластоцист методом микроскопии нативного мазка кала с 2%-ным раствором Люголя. Для повышения достоверности результатов выявления Blastocystis spp. целесообразна комбинация микроскопического исследования с методом ПЦР.
С учетом потенциальной роли Blastocystis spp. в генезе симптомов кишечной диспепсии, нарушения качественного и количественного состава микробиоты кишечника, прогрессирования и ухудшения течения гастроэнтерологических заболеваний в алгоритм обследования пациентов с патологией органов пищеварения необходимо включать лабораторные исследования (микроскопию нативного мазка кала и ПЦР), направленные на выявление данного простейшего, при его наличии – устанавливать диагноз бластоцистной инвазии и назначать противопротозойную терапию.
Согласно СанПиН 3.2.3215-14 «Профилактика паразитарных болезней на территории Российской Федерации» (с изменениями на 29.12.2015) критерием эффективности лечения служат два отрицательных результата лабораторного исследования, проведенного с интервалом в 2–3 дня.
