Вакцина Гам-КОВИД-Вак (Спутник V) не оказывает негативного влияния на сперматогенез у мужчин

Одним из эффективных способов профилактики новой коронавирусной инфекции SARS-CoV-2 является вакцинация. В 2020 г. была зарегистрирована вакцина Гам-Ковид-Вак, содержащая фрагмент генетического материала SARS-CoV-2 [1]. В настоящее время во всем мире проводится вакцинация от новой коронавирусной инфекции SARS-CoV-2, однако доля вакцинированных людей в разных странах колеблется от 75,6% (Мальта) до 0,01% (Уганда). В России на 05.07.2021 доля вакцинированного населения составила 12,19% (https://yandex.ru/covid19/stat). Несмотря на доказанную высокую эффективность вакцины Гам-Ковид-Вак в отношении профилактики тяжелых форм новой коронавирусной инфекции, у многих мужчин вызывает опасение возможное влияние вакцинации на репродуктивное здоровье. Одной из причин, послужившей началом изучения влияния вакцины Гам-Ковид-Вак на репродуктивное здоровье, выступает возможное влияние вакцинации на развитие аутоиммунных заболеваний с вовлечением гонад [2–4].

За все время вакцинации в литературе накоплено мало данных о влиянии различных видов вакцин на репродуктивную функцию человека [5–7]. Вакцина Гам-Ковид-Вак является комбинированной векторной вакциной, в основе которой использован аденовирусный вектор. В работе Talotta et al., опубликованной в 2021 г., было сделано предположение о том, что вакцины на основе аденовирусных векторов могут вызывать нарушения регуляции синтеза интерферонов (ИФН) типа I [8]. Изменения синтеза ИФН типа I теоретически могут приводить к иммуновоспалительным ревматическим заболеваниям, среди которых следует выделить системную красную волчанку (СКВ), антифосфолипидный синдром (АФС) и ревматоидный артрит (РА) [9].

Согласно результатам мета-анализа Bin Wang et al. (2017), включающего 16 обсервационных исследований, вакцинация повышает риск развития СКВ и РА [10]. Кроме этого, было экспериментально установлено, что введение столбнячного анатоксина вместе с адъювантами у предрасположенной линии мышей сопровождалось развитием АФС [11, 12]. Потенциальное влияние вакцинации на развитие иммуновоспалительных ревматических заболеваний и, как следствие, на репродуктивное здоровье мужчин, позволяет по-новому взглянуть на патогенез аутоиммунных реакций, развивающихся у предрасположенных лиц в ответ на введение в организм веществ-адъювантов (ASIA-синдром). На данный момент на стадии проведения находится несколько исследований по влиянию вакцинации от SARS-CoV2 на репродуктивную функцию человека (www.clinicaltrials.gov). Результаты недавно опубликованных единичных исследований не показали негативного влияния вакцинации на сперматогенез у мужчин [13–15]. В связи с этим изучение влияния вакцины от COVID-19 на репродуктивную функцию у мужчин является актуальным научным исследованием. Поскольку из всех отечественных вакцин только вакцина Гам-КОВИД-Вак (Спутник V) прошла все стадии клинических испытаний, она была взята для изучения влияния на сперматогенез у мужчин [16].

Целью исследования было оценить влияние вакцины Гам-КОВИД-Вак (Спутник V) на спермато­генез, гормональный профиль и уровень антифосфолипидных антител у мужчин.

Материалы и методы

В проспективное исследование было включено 45 мужчин, которым была проведена вакцинация от инфекции, вызываемой SARS-CoV-2, вакциной Гам-КОВИД-Вак (Спутник V). Критериями включения в исследование были возраст от 18 до 55 лет, нормальные или субнормальные параметры спермограммы перед вакцинацией, отсутствие в анамнезе COVID-19, отрицательный результат исследования на SARS-CoV-2 методом ПЦР и отрицательные результаты тестов на IgG антитела к SARS-CoV-2 перед вакцинацией. Критериями невключения были противопоказания к вакцинации согласно инструкции, онкологические заболевания любой локализации, ревматические и аутоиммунные заболевания, туберкулез, хронические системные инфекции, отягощенный аллергологический анамнез, проводимая гормональная терапия и любая вакцинация за 30 дней до включения в исследование, лечение иммуноглобулинами и иммуномодулирующими препаратами за 3 месяца до включения в исследование. Критериями исключения были COVID-19 в период вакцинации, серьезная нежелательная реакция, требующая отмены ввода 2-й дозы вакцины, отказ пациента от дальнейшей вакцинации.

Определение концентрации лютеинизирующего гормона (ЛГ), фолликулостимулирующего гормона (ФСГ), общего тестостерона выполнялось в сыворотке крови электрохемилюминесцентным методом на автоматическом иммунохимическом анализаторе «Cobas е411» (Roche Diagnostics GmbH, Германия) с использованием коммерческих наборов данного производителя. Определение концентрации тиреотропного гормона (ТТГ) выполнялось в сыворотке крови иммунохемилюминесцентным методом на автоматическом иммунохимическом анализаторе «IMMULITE 2000» (Siemens, США). Исследование сыворотки крови на антифосфолипидные антитела (АФА) классов M и G: к кардиолипину (аКЛ), β2-гликопротеину-1 (аβ2-ГП-1), аннексину V (аАн V), фосфатидилсерину (аФС), выполнялось с помощью иммуноферментного анализа с использованием наборов «ORGENTEC Diagnostika» (Германия). Также проводилось определение антител класса IgG к SARS-CoV-2 в сыворотке крови с помощью иммуноферментного анализа с использованием тест-системы «Набор реагентов для выявления антител класса G к spike белку SARS-CoV-2 методом иммуноферментного анализа» (НПО «Диагностические системы», Россия). Измерение результатов производилось на спектрофотометре «Infinite F50» (TECAN, США).

Для оценки патологии эякулята (патоспермия) руководствовались референсными значениями показателей эякулята, согласно лабораторному руководству ВОЗ [17] (табл. 1).

Критериями патоспермии считали:

• олигозооспермия – снижение концентрации сперматозоидов ниже <15 млн/мл;
• астенозооспермия – снижение подвижности сперматозоидов ниже нормальных значений (общая подвижность <40%, сперматозоиды с прогрессивным движением <32%);
• тератозооспермия – повышение количества сперматозоидов с аномальной морфологией (>96%).

Дополнительно проводили количественное определение антиспермальных антител IgG с использованием латексных частиц на поверхности сперматозоидов (норма ≤ 50%) и определение ДНК-фрагментации сперматозоидов методом TUNEL (норма <15%).

Статистический анализ

Для статистического анализа использовался пакет статистических программ Statistica 10 (США). Данные были представлены абсолютными показателям и % для категориальных данных, медианами (с интерквартильным размахом) для количественных данных. Сравнение медиан проводилось методами попарного тестирования – с применением парного t-критерия Вилкоксона для связанных выборок в виду ненормального распределения данных для всех величин. Нормальность распределения данных оценивалась с использованием критерия Шапиро–Уилка. Корреляционный анализ проводили с использованием критерия Спирмена. Различия между статистическими величинами считали статистически значимыми при р<0,05.

Исследование было одобрено комиссией по этике ФГБУ «НМИЦ АГП им. В.И. Кулакова» Минздрава России.

Результаты

Возраст мужчин составил 36,0 (30,0–44,0) лет, индекс массы тела (ИМТ) – 25,9 (23,5–28,7) кг/м2.

При оценке клинико-анамнестических данных было выявлено, что заболеваемость пациентов была низкая и была представлена бронхиальной астмой – у 2 (4,4%), артериальной гипертонией – у 1 (2,2%), хроническим тонзиллитом – у 2 (4,4%), хроническим гастритом – у 3 (6,7%), хроническим простатитом – у 3 (6,7%), полинозом – у 3 (6,7%) мужчин.

Вакцинация в целом переносилась пациентами хорошо, не было отмечено серьезных нежелательных явлений на введение вакцины. Реакция на ведение вакцины чаще отмечались после 2-го компонента и была кратковременной (1–2 дня). У 7 (15,5%) пациентов отмечалась местная реакция в месте введения вакцины, у 43 (95,5%) – субфебрильная температура, у 13 (28,9%) – симптомы интоксикации в виде головной боли и/или миалгии.

Специфические антитела к SARS-CoV-2 IgG были выявлены почти у всех вакцинированных пациентов, только у 3 (6,7%) пациентов их уровень не достиг порогового значения позитивности.

При сравнении средних параметров спермограммы до и после вакцинации не было получено значимых отличий, включая уровень антиспермальных антител класса G и ДНК-фрагментацию сперматозоидов (табл. 2).

При сравнении динамики параметров спермограммы до и после вакцинации у мужчин с патоспермией (n=17) по сравнению с мужчинами с нормоспермией (n=28) не было выявлено значимой разницы. Дельта концентрации сперматозоидов в 1 мл эякулята у пациентов с патоспермией составила 0,5 (-19,0–8,7), с нормоспермией – 7,0 (-11,0–29,0) (р>0,05). Дельта общей подвижности сперматозоидов у пациентов с патоспермией составила –3,0 (-5,0–1,0)%, с нормоспермией – 3,0 (-5,0–1,0)% (р>0,05). Дельта числа нормальных форм сперматозоидов у пациентов с патоспермией составила 0,0 (0,0–0,0), с нормоспермией – 0,0 (0,0 – 0,0) (р>0,05). Лейкоцитоспермии с концентрацией лейкоцитов более 1 млн/мл не наблюдалось ни у одного пациента как до, так и после вакцинации. При сравнении средних параметров гормонального профиля до и после вакцинации также не было получено значимых отличий показателей (табл. 3).

Далее был проанализирован уровень АФА до и после вакцинации (рисунок). Наблюдалось незначимое снижение уровня а-β2-ГП-I IgG, аКЛ IgM и аФС IgG после вакцинации по сравнению с исходными значениями. При этом уровень АФА у всех пациентов не превысил референсные значения.

Был проведен корреляционный анализ зависимости изменения параметров спермограммы (общее количество сперматозоидов, общая подвижность сперматозоидов, жизнеспособность, процент морфологически здоровых форм, процент прогрессивно-подвижных форм) и АФА класса M и G к аКЛ, аβ2-ГП-1, аАн V и аФС, в результате которого не было выявлено значимых связей (r<0,20, р>0,05).

В отличие от отсутствия влияния вакцины на сперматогенез у мужчин, имеются данные о негативном влиянии перенесенной COVID-19 на репродуктивную функцию. Была выявлена широкая представленность рецепторов для SARS-CoV-2 (ангиотензин превращающего фермента (ACE2), трансмембранной сериновой протеазы 2 (TMPRSS2), CD147 (басигина)) в репродуктивных органах и тканях человека [18–22]. Следует подчеркнуть, что спайковый белок SARS связывается с рецептором ACE2, способствуя проникновению вируса в клетку-мишень [23]. В исследовании Haghpanah A. et al. было показано, что проникновение вируса SARS-CoV-2 в сперматогонии, клетки Лейдига, а также клетки Сертоли может приводить к изменению уровня половых гормонов, повышению ДНК фрагментации, а также к снижению подвижности сперматозоидов [24]. Опубликованные результаты других работ подтверждают негативное влияние COVID-19 на сперматогенез [25] и гормональный профиль мужчин [26]. Нельзя исключить, что взаимодействие вируса SARS-CoV-2 с рецептором ACE2 может инициировать развитие специфического эпидидимоорхита за счет формирования системного васкулита [27, 28].

Заключение

Настоящее исследование является одним из первых, в котором было проведено изучение влияния отечественной вакцины Гам-КОВИД-Вак на сперматогенез, гормональный профиль и уровень АФА у мужчин. Все пациенты, включенные в исследование, исходно имели нормальные или субнормальные показатели спермограммы и не страдали от серьезных соматических заболеваний. У них также были исключены все факторы, которые могли бы как-то повлиять на избыточный аутоиммунный ответ.

Согласно полученным предварительным данным, вакцина Гам-КОВИД-Вак не оказывает негативного влияния на сперматогенез и гормональный профиль у мужчин, в том числе у мужчин с умеренной патоспермией (олигоастено- и/или тератозооспермией). Кроме того, вакцинация не вызывает повышения уровня АФА, а также антиспермальных антител (MAR), что косвенно может свидетельствовать об отсутствии изменений репродуктивной функции аутоиммунного генеза под влиянием вакцины. Исследование будет продолжено с включением в исследуемую группу 200 мужчин.